Clarissa

Pharmaceutical Chemist Biologist

[Clarissa @Clarissa_Ov]

Hi
@LatinXChem, I share my poster hoping it will be of interest to all of you.

Evaluation of reductase activity of broad bean seeds

#LatinXChem22 #LXChemOrg #OC033 #organicchemistry #research

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@davidcaceres_mx @LatinXChem Perdón, no es referente al benzaldehído, es para reducir cetonas (específicamente la 4-acetilpiridina)

[Clarissa @Clarissa_Ov]

Hi @LatinXChem, I share my poster hoping it will be of interest to all of you.

Obtaining enantiopure alcohols using Vicia faba (Broad Bean) seeds as a source of biocatalyst

#LatinXChem22 #LXChemOrg #OC032 #organicchemistry #research

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@davidcaceres_mx @LatinXChem Te comparto el perfil de @Elizabeth03218 para que conozcas un poco más sobre otras investigaciones de bioreducción que llevamos a cabo en el laboratorio

[Clarissa @Clarissa_Ov]

Hi
@LatinXChem, I share my poster hoping it will be of interest to all of you.

Evaluation of reductase activity of broad bean seeds

#LatinXChem22 #LXChemOrg #OC033 #organicchemistry #research

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@davidcaceres_mx @LatinXChem Para estudiar la reducción del benzaldehído no sé utiliza ningún agente porque utilizamos el alcohol bencílico cómo estándar y se utiliza esta reacción como un modelo para evaluar la actividad reductasa

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@davidcaceres_mx @LatinXChem Nosotros preferimos usar buffer de fosfatos porque se ha observado, incluso con otras fuentes vegetales, que HEPES mejora la conversión pero no afecta el exceso enantiomérico y es una sal más cara.

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@davidcaceres_mx @LatinXChem Nuestra teoría es que la sal de HEPES mejora las interacciones entre la enzima y el sustrato para obtener una mayor conversión del benzaldehído pero es un aspecto muy interesante a seguir investigando.

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@davidcaceres_mx @LatinXChem Es un tema muy poco investigado el efecto de estos buffer sobre el %Conversión y el efecto que tiene sobre la interacción enzimática, sobre todo las reducciones enzimáticas con semillas de haba.

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@OCortezano @LatinXChem Con éste mismo procedimiento, para reducir 1g de benzaldehído, se necesitaría aprox. 1000 mL de extracto acuoso.

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@OCortezano @LatinXChem A cada reacción se le añade la fuente enzimática (harina de haba seca, extracto acuoso, inmovilizado, etc) junto con 1.5 𝜇L de benzaldehído disuelto en isopropanol, se agitan a 35°C/20 horas y se extrae cada reacción con acetato de etilo para determinar el % conversión por CG.

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@OCortezano @LatinXChem Cuando hay 100% de ee, sólo se observará en el cromatograma una señal, lo que indica que no hay presencia del otro enantiómero y si se desea conocer la configuración absoluta, se haría una prueba para determinar la rotación óptica.

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@OCortezano @LatinXChem Para determinar el ee se utiliza HPLC quiral, en el que se logran separar los enantiómeros por la interacción que tienen con la fase estacionaria y en el cromatograma se ve cada enantiómero en señales diferentes, después se determina el área de cada señal y su relación en %ee

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@OCortezano @LatinXChem Respondiendo a sus preguntas:
No se juntaron ambos en uno solo porque en el de benzaldehído se evalúa la fuente enzimática con el mayor %Conv y en el otro se evalúa la reducción de una molécula diferente, 4-acetilpiridina, utilizando la fuente enzimática seleccionada en el 1ro.

[Clarissa @Clarissa_Ov]

@shiva8947043939 @LatinXChem Thanks!